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          蛋白印跡膜再生液實際操作技巧和注意事項
          點擊次數:8012 更新時間:2021-03-17

          蛋白印跡膜再生液說明書

          Stripping Buffer

          目錄號:K0056

          保存條件:室溫(15-25℃)保存。

           規格說明

           Cat. No.  K0056      K0056A

          Volume     100 ml      500 ml   

           產品簡介

            本產品采用溫和洗滌配方,可在不影響目的蛋白的情況下,去除結合在印跡膜上

          的一抗和二抗,使同一張膜可進行多次抗體檢測,無需反復電泳和轉膜,節省樣品和

          時間,適用于使用NCPVDF膜進行Western Blot檢測時條件的優化或同一樣品不同蛋

          白的檢測。

           本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途    

           注意事項

           1.建議先檢測表達量較低的目的蛋白,用再生液處理后檢測表達量高的蛋白,如內參蛋白等。

          2.請佩戴手套操作。

           操作步驟

           1.將曝光后的膜取出,加入適量的再生液(再生液充分覆蓋膜表面,8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液),室溫振搖孵育15分鐘左右(孵育時間應根據不同的目的蛋白來調整:比如內參抗體等表達量較高的蛋白,使用再生液時可以延長孵育時間至1小時或者在37℃孵育30分鐘)。

          2.棄去再生液,用15 ml緩沖液(PBSTTBST)洗膜3次,每次5 分鐘,室溫振搖。

          3.為了檢測酶標二抗洗脫是否*,此時可以用顯色方法來確定二抗是否洗脫掉。

          4.待檢測完畢,確認膜上無殘留的酶活性,再生后的膜通過加入15 ml的封閉液進行封閉,室溫30分鐘或者4℃封閉過夜。

          5.重新加入待測一抗,進行下一輪的WB實驗。

           

          實驗代做服務:

           

          WB代做

          HE染色

          免疫熒光染色

          蛋白相互作用分析

          ELISA免費代檢測

          免疫組化

          熒光定量PCR

          番紅O固綠染色

          流式細胞檢測

          激光共聚焦

          透射電鏡服務

          DNA甲基化實驗

          免疫共沉淀(Co-IP

          DNA甲基化

          掃描電鏡實驗

          microRNA 測序

          半定量RT-PCR

          分子克隆和質粒載體構建服務

          原位雜交(FIsh

          石蠟/冰凍切片

          RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP

          CCK8檢測

          蛋白雙向(2-D)電泳

          蛋白雙向2D-WB

          ATP/ADP檢測

          Taqman探針

          細胞劃痕

          基因組DNA提取

           

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